阿司匹林抵抗与基因多态性的研究进展_药学论文十篇

阿司匹林抵抗与基因多态性的研究进展_药学论文十篇

【医药论文】导语，你所欣赏的本篇共有38227文字，由郝伟成细致修改之后，发表于美文档 www.meiword.com！苦杏仁，别名：杏仁。拉丁文名：Semen Armeniacae Amarum.为蔷薇科植物山杏，夏季采收成熟果实，除去果肉及核壳，取出种子，晒干。阿司匹林抵抗与基因多态性的研究进展_药学论文十篇感谢大家借鉴！

阿司匹林抵抗与基因多态性的研究进展_药学论文 第一篇

              作者：颜雪琴 茅新蕾 陈卫东

  阿司匹林抵抗;基因多态性

阿司匹林作为一种有效的抗血小板聚集药物广泛应用于心脑血管疾病的防治，临床观察显示阿司匹林能减少约25%的心脑血管疾病复发。然而，并不是所有患者都能从阿司匹林治疗中获益，有研究显示0.4%～83.3%个体对阿司匹林的抗血小板作用不敏感，即存在阿司匹林抵抗现象(aspirin resistance,ar) 。阿司匹林抵抗的确切机制不明，遗传可能为其重要因素，本文将近年ar与基因多态性方面的研究作如下综述。

　1 阿司匹林抵抗

1.1 阿司匹林抵抗的定义 bhatt[2]等将阿司匹林抵抗分为临床性及生化性。临床性为患者口服阿司匹林后仍发生缺血性血管疾病;生化性为口服阿司匹林后，未能改变血小板功能试验结果。

1.2 阿司匹林抵抗的分型 有研究[3]将生化性阿司匹林抵抗分为3型：(1)ⅰ型阿司匹林抵抗(药动学型)：口服同样剂量的阿司匹林，体内血栓素(tx)合成和胶原诱导血小板聚集均未被抑制。而体外富血小板血浆中加入100 μmol/l阿司匹林后可被抑制，提示使用小剂量阿司匹林有相当大的药动学差异。Www.meiword.COm(2)ⅱ型阿司匹林抵抗(药效学型)：无论体内及体外，口服阿司匹林后，tx合成和胶原诱导血小板聚集均未被抑制，提示该型阿司匹林抵抗的机制与环氧化酶(cox)的遗传多态性有关。(3)ⅲ型阿司匹林抵抗(假性阿司匹林抵抗)：口服阿司匹林后能抑制tx合成，但不能抑制胶原诱导的血小板聚集。该型患者之所以被冠以“假性抵抗”，因为阿司匹林已抑制了tx合成，而不能抑制其他物质如胶原诱导的血小板聚集。

　2 阿司匹林抵抗机制

ar发生的具体机制尚不清楚，可能与药物剂量不足，环氧化酶1(cox1)及血小板糖蛋白(gp)的基因多态性，胶原，吸烟，血脂异常等多种因素有关。血小板活化路径可由血栓素a2(thromboxanea2，txa2)、二磷酸腺苷(adenosine diphosphate，adp) 、胶原、凝血酶和糖蛋白(glycoprotein，gp)ⅱb/ⅲa 受体等诱导,而阿司匹林仅能有效地阻断血栓素a2途径。目前，对于血小板活化路径及基因多态性与阿司匹林抵抗的关系研究主要集中在以下几个方面[56]：(1)血栓素激活途径中编码环氧合酶1 (cycloxygenase1 ，cox1) 的基因多态性。(2)gpⅱb/ⅲa激活途径中编码血小板膜gpⅲa的血小板抗原1/血小板抗原2 (platelet antigen1/platelet antigen2，pla1/pla2)多态性。(3)胶原激活途径中编码血小板膜gpⅰa/gpⅱa的807c/t和873g/a多态性。(4)5二磷酸腺苷受体p2y1的基因多态性。这些多态性位点有可能影响阿司匹林的抗血小板作用。现从基因水平阿司匹林抵抗的机制。

2.1 环氧合酶基因多态性 cox是前列腺素合成过程中的重要限速酶，它有两种同工酶：cox1和cox2。cox1是花生四烯酸转换为前列腺素g/h途径中的第一个酶，其有两种酶活性，一种环氧化酶活性催化前列腺素g的生成，一种氢过氧化物酶(hox)活性减少前列腺素g，生成前列腺素h，前列腺素h更进一步被cox催化成为前列腺素和血栓素[7]。阿司匹林抗血小板作用机制主要是使cox1丝氨酸530不可逆的乙酰化，从而使该酶失活，阻断了txa2的形成。目前已发现多个cox基因多态性位点[8]，不同cox的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphis，snps)可影响cox的蛋白结构或构象，使其对阿司匹林抑制作用的敏感性极不均一，构成一些病人ar的结构基础。

maree等[9]将144位冠心病患者按cox1单核苷酸多态性分为五组[a842g，c22t(r8w)，g128a(q41q)，c644a(g213g) 和c714a(l237m)],均给予阿司匹林口服，发现a842g与c50t完全连锁不平衡。携带含有突变体842g等位基因的患者与野生型a842相比，花生四烯酸诱导的血小板激活和血清血栓烷b2 (txb2 ，txa2 的下游产物)产生更明显,提示携带突变体842g等位基因的患者对阿司匹林治疗较不敏感。表明cox1的遗传变异性可以影响花生四烯酸诱导的血小板聚集和血栓形成，病人对阿司匹林的反应部分决定于cox1的基因型。gonzalezconejero等[10]的研究则显示cox1 50t等位基因可能与阿司匹林抵抗有关。

2.2 血小板糖蛋白(gp)ⅱb/ⅲa基因多态性 血小板糖蛋白gpⅱb/ⅲa是细胞黏附受体整合素家族中的一员，含有纤维蛋白、纤维连接蛋白、von willbrand factor(vwf)等黏附蛋白的特异结合位点，参与血小板黏附和聚集。ar可能和血小板膜gpⅱb/ⅲa受体复合物的多态性有关，gpⅱb/ⅲa受体是血小板活化的最后共同通路。编码gpⅱb/ⅲa的基因具有高度的多态性。gpⅱb/ⅲa基因(包括编码gpⅱb和gpⅲa的基因) 突变、缺失或插入导致表型改变，进而引起血小板功能改变。迄今已发现c157t、a1163c、a1553g、t1565c等多个gpⅲa多态性位点，较为常见的是外显子2第1565位氨基酸的突变，即t1565c(leu33pro) ，编码leo的位点称为pla1(hpa1a)，编码pro的位点称为pla2 (hpa1b)。关于gpⅱb基因多态性的研究较少，主要有gpⅱbmax/max +(g2603a，v837m)，hpa3a/3b(t2622g，ile843ser) ，gpⅱbg1063a(glu324lys) 等多态现象，其中研究最为广泛和深入的是gpⅱb残基843位ile/ser的变异，它与人类血小板抗原3 (hpa3) 相关。

大量证据表明，gp受体多态性是动脉血栓形成的遗传危险因素，它能造成黏附受体成分的表达、功能和免疫遗传学的多样性。血小板激动剂(如txa2)通过细胞内激活gpⅱb/ⅲa受体，介导纤维蛋白原及其受体结合，然后促进血小板聚集。阿司匹林通过干扰cox非依赖性细胞内转导并使gpⅱb和gpⅲa分子乙酰化来抑制gpⅱb/ⅲa的活化。尽管还未完全弄清，但目前所知的cox非依赖性转导途径可能包括跨膜蛋白受体、磷脂酶、ca2 +释放、腺苷酸环化酶、鸟苷酸环化酶和蛋白激酶c等。某些弱的激动剂(如adp、肾上腺素和胶原蛋白)导致的gpⅱb /ⅲa激活可被阿司匹林部分抑制。在pla2基因型存在时,抗血小板作用可以因这种替代途径减少而降低。

agnieszka slowik等[11]研究发现pla2等位基因是男性患者大血管病变所致卒中的危险因素。该研究分别选取92例大血管病变所致卒中患者及184例对照者，103例小血管病变所致卒中患者及206例对照者，182例心因性卒中患者及182例对照者。结果显示小血管病变及心因性卒中患者与对照者相比，pla2等位基因出现的频率相似，无统计学意义;而大血管病变所致卒中的男性患者pla2出现频率高(39.7% vs 23.0%;p=0.003 ，or=2.51;ci为1.21～5.20)。grove等[12]检测了1191例健康人和1019例冠心病患者的pla2频率，在这些患者中529例以前有过心肌梗死史。结果健康人中28%为pla2基因型，28%的冠心病患者(除外心肌梗死患者)为pla2基因型，35%的心肌梗死患者为pla2阳性。健康对照与心肌梗死患者之间pla2基因频率有统计学差异。因此，他们认为斯堪的纳维亚人pla2基因型与心肌梗死而不是冠心病的危险增加有关。szczeklik a研究的结果提示与pla1相比，pla2等位基因更倾向于促进血栓的形成从而参与了阿司匹林抵抗的发生。papp e等[13]研究也发现,阿司匹林抵抗患者中pla2等位基因出现的频率要明显高于那些对阿司匹林有良好反应的受试者，而且该研究中所有pla2/a2 基因型患者对阿司匹林的抗血小板反应均不良。这就提示pla2等位基因可能与阿司匹林疗法反应的不充分、不敏感相关。然而，macchi等[14]的研究发现pla1等位基因更容易对小剂量阿司匹林治疗发生抵抗。

2.3 血小板糖蛋白gpⅰa/ⅱa受体基因多态性 gpⅰa/ⅱa (整合素α2β1 )位于连接血小板与胶原纤维(ⅰ、ⅱ型)或非胶原纤维( ⅲ、ⅳ型)的二价阳离子键的中间。在正常个体与那些先天遗传存在α2基因的四个等位基因的个体中,其血小板表面表达的gpia/ⅱa是不同的。gpia基因位于第5号染色体上，对于这一基因的一些相关研究，揭示它的一些有症状或无症状的多态现象，以及由此引起的受体的结构和功能的改变，以及血小板表面的gpⅰa/ⅱa受体多拷贝间的差异。α2gpia多态性—807ct(phe224)和873ga(thr246)已被证实与血小板表面受体不同的表达有关。基因型807tt(873aa)与受体的高密度表达有关，而807cc(873gg)则与低密度表达有关。杂合子则与中间受体表达的水平有关。第三种多态性是由于1648位点上g到a被替换所致，这同时也引起505位点(br系统)上glu/lys被替换。同时，gpia807c/t与glu505 lys之间存在基因相关，且br的多态性与位于核苷酸环化酶837(ct)上的一个稀有多态性相连结，携带等位基因i(807t/873t/873a /brb)者表现出高水平的gpⅰa/ⅱa，而携带等位基因ⅱ(807c /837t/873g/brb)和ⅲ(807c/837c/873g/bra)者则表现出低水平的血小板整合素。胶原是一种重要的血小板聚集诱导剂，血小板胶原受体血小板膜糖蛋白ⅰa/ⅱa密度增加可能是血栓形成的潜在危险因素和阿司匹林抵抗的原因，血小板膜糖蛋白ⅰa/ⅱa基因多态性可以增加血小板膜胶原受体的密度[15]，从而降低阿司匹林疗效。

2.4 adp受体p2y1基因的变化 adp是血小板聚集的重要介质，adp的调节作用是通过与血小板表面g蛋白偶联p2y受体相连接而实现的。迄今为止已有8种p2y受体亚型被克隆，对p2y1和p2y12的研究较清楚。gαq偶联p2y1受体与adp结合，使钙离子释放，改变血小板形状，使血小板聚集。另一种主要的受体p2y12与g蛋白gi偶联,抑制腺苷酸环化酶，活化磷酸肌酸激酶3，活化gpⅱb/ⅲa受体。任何一个受体的抑制均会引起血小板聚集的显著减少。

adp通过p2y1和p2y12受体血小板的激活和聚集，这些受体的突变与止血异常有关，任何一个受体的抑制均会引起血小板聚集的显著减少。阿司匹林以协同方式减少这些情况的发生[16]。p2y12和阿司匹林的复合拮抗作用已在临床上被证实可显著减少血栓事件的发生[17]。因此，adp受体p2y1基因的相应功能变化能够改变adp的功能，并且能降低对阿司匹林(包括p2y12抑制剂，如噻氯匹啶和氯吡格雷)的反应性，导致血栓前状态的产生和对阿司匹林的反应性降低。

fontana等[18]在98名健康研究对象中发现了p2y12受体5种多态性，其中4种是完全连锁不平衡。这导致两种单倍体产生，h1 (86%)和h2 (14% ) 。携带h2单倍体的受试者使用较低浓度的adp (2 μm) ，血小板聚集增多。纯合子h1 (h1 /h1)平均聚集率为34. 7% (n= 74) ，有一个h2等位基因(h1 /h2，n= 21)聚集率为67. 9% ，在有2个h2等位基因(h2 /h2，n=3)聚集率高达82. 5%。这提示p2y12多态性在阿司匹林抵抗中可能起作用。近来发现p2y1 受体a1622g多态性与血小板对adp反应不同相关。携带少见的g等位基因对adp反应更强。jefferson等[19]在332例男性有心肌梗死史的患者中研究发现阿司匹林抵抗患者与p2y1基因c893t多态性密切相关。携带杂合子c893t等位基因患者与携带常见纯合子c893等位基因者相比阿司匹林抵抗率高出3倍，机制尚不清楚。

以上综述了近年来关于基因多态性与阿司匹林抵抗关系的研究结果。由于没有国际公认的对阿司匹林抵抗的定义，多数研究样本量较小，研究结果间还存在很多矛盾，迄今为止遗传对阿司匹林抵抗的作用并不确切。所以仍需继续开展大规模和不同种族人群中的前瞻性研究来证实这些基因多态性与ar有关。

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中药研究与开发_药学论文 第二篇

  目的 研究大黄中5种羟基蒽醌对金黄色葡萄球菌的抑菌作用。方法 采用ph梯度萃取法从大黄中提取出蒽醌成分,采用体外实验及二分法测定各成分的抑菌效果。结果 大黄中大黄素、芦荟大黄素、大黄酸有抑菌作用,大黄酚与大黄素甲醚无抑菌作用。抑菌效果大黄素最好,芦荟大黄素次之,大黄酸最差。结论 大黄具有抑菌作用。

  大黄；金黄色葡萄球菌；二分法

   abstract：objective to study the effect of five free anthraquinones of rheum on staphylococcus aureus. method total anthraquinones was extracted by ph grades extraction, and the effect on restraining bacterium was measured by bisection method. result emodin, aloe-emodin, rhein has the effect of restraining bacterium, chyrsophanol and physcion has not the effect of restraining bacterium. of the effect on restraining bacterium, emodin is the best, then is aloe-emodin, rhein is the worst. conclution rheum has the effect of restraining bacterium.   key words：rheum；staphylococcus aureus；bisection method    现代药理研究证明,大黄具有抗菌、抗肿瘤、降低血压、健胃、利胆、保肝、强心、延缓衰老、调节免疫功能等作用。wwW.meiword.cOM大黄中含有的最主要的5种羟基蒽醌是：大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚。本实验主要通过对这5种羟基蒽醌的提取、分离及对金黄色葡萄球菌的抑菌效果进行比较,旨在为大黄在抗菌方面的应用提供一定的实验依据。

1  实验材料 

大黄购于沈阳中街新药特药,金黄色葡萄球菌staphy- lococcus aureus 209p购于辽宁省药品检验所。

2  方法与结果　

2.1  大黄总蒽醌的提取

称取25 g的大黄粗粉,置于圆底烧瓶中,先加入50 ml的20%硫酸,再加入125 ml的氯仿,75 ℃回流4 h。

2.2  游离蒽醌的分离[2]

本实验采用ph梯度萃取法进行分离。氯仿总提取液50 ml,加ph 8的缓冲液17 ml,振摇,静置,缓冲液层加盐酸酸化至ph 3,静置,沉淀,抽滤得大黄酸,用冰醋酸重结晶得大黄酸精品。剩余氯仿层加ph 9.9的缓冲液30.5 ml,振摇,静置,缓冲液层加盐酸酸化至ph 3,静置,沉淀,抽滤得大黄素,用冰醋酸重结晶得大黄素精品。剩余氯仿层加ph 13的缓冲液60 ml,振摇,静置,缓冲液层加盐酸酸化至ph 3,静置,沉淀,抽滤得芦荟大黄素,用冰醋酸重结晶得芦荟大黄素精品。剩余氯仿层回收氯仿,得大黄酚与大黄素甲醚混合物。

2.3  提取物溶液的配制

将各提取物用其相应的缓冲液配制成浓度6 mg/ml的溶液。

2.4  大黄中5种游离蒽醌抑菌作用的检验

2.4.1  培养基的制备

牛肉浸膏0.15%,酵母浸膏0.6%,蛋白胨0.6%,葡萄糖0.1%,琼脂1.8%,ph 6.9～7.1,常水配制。

2.4.2  操作过程

制备50 ml培养基,灭菌30 min。在超净工作台上,先倒出30 ml至培养皿中,再于50 ℃左右向另外20 ml培养基中迅速加入0.6 ml菌悬液,混匀,倒入同一个培养皿中。待培养基凝固后,分别点上5 μl、浓度为6 mg/ml的各提取物溶液。在37 ℃恒温培养箱中培养10 h,然后进行美蓝染色。量取100 ml 95 %乙醇,加浓盐酸1滴,即为酸性乙醇。量取100 ml 95%乙醇,加氢氧化钠2 g,振摇,待溶解后即为碱性乙醇。取美蓝溶液20 ml倒入平板中,用三角耙涂匀,2 min后倾去,倒入酸性乙醇20 ml,2 min后倾去,倒入碱性乙醇20 ml,2 min后倾去。细流自来水冲洗3 min,倾去并吸干浮水,快速贴上滤纸1张,用三角耙赶走气泡,10 min后揭下滤纸,晾干。5种游离蒽醌抑菌圈直径：大黄酸为5 mm,大黄素为9 mm,芦荟大黄素为3 mm,大黄酚与大黄素甲醚混合物为0 mm。

2.4.3  二分法测定各提取物对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度[3]

准备16支试管,其中1支作为空白对照组,其余15支平均分成3组,分别代表3种不同的成分,每组分成ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ、ⅴ号,并用记号笔标明。然后用相应的缓冲液配制成不同浓度的提取物溶液,向试管中加入培养基(配方与2.4.1相同,但不加琼脂),将培养基与提取物溶液充分混合后,灭菌。最后在超净工作台上分别向3组试管中(除空白对照组)分别加入金黄色葡萄球菌菌悬液。具体加入量见表1～表3。培养24 h酸的ⅱ、ⅲ、ⅳ、ⅴ号试管全部长菌,只有ⅰ号试管没有长菌；芦荟大黄素的情况与大黄酸一样,只有ⅰ号试管没有长菌。大黄素的抑菌作用最好,ⅰ、ⅱ管都没有长菌,ⅲ、ⅳ、ⅴ号试管全部长菌表1  大黄酸不同浓度溶液的抑菌作用（略）表2  大黄素不同浓度溶液的抑菌作用（略）表3  芦荟大黄素不同浓度溶液的抑菌作用（略）

3  讨论

二分法具有简便、准确、省时等特点。将待测成分按其前一个的一半浓度稀释,首先在数值计算上很方便,不用大量的计算；其次在配溶液时不容易弄乱出错,只进行稀释半倍即可；第三是在做出结果后,直接用肉眼就可以观察结果,方便快捷,无须动用其他仪器,节省时间。实验结果表明,大黄中大黄素、芦荟大黄素、大黄酸有抑菌作用,大黄酚与大黄素甲醚无抑菌作用。抑菌效果大黄素最好,芦荟大黄素次之,大黄酸最差。

张 梅.中药化学基础.：化学工业出版社,20xx.85.

[2] 袁倚盛.大黄游离蒽醌的制备与纯化[j].中草药,2000,31(7)：508.

[3] 郑钧镛.药品微生物学及检验技术[m].：卫生出版社,1989.149.

儿童抗生素的合理应用_药学论文 第三篇

本文从抗生素不合理使用的表现、不良后果、合理使用原则、常见病抗生素的合理应用、儿童不抗生素是临床上应用范围广,种类繁多的一大类药物。合理使用抗生素对病情的转归,患儿的健康成长至关重要。当前抗生素滥用情况非常严重,引起很多不良反应,细菌耐药性也大大增加。在基层医院更是如此。解决抗生素的合理使用已迫在眉睫。

 1  临床抗生素不合理使用的表现

 (1）无论感染还是非感染疾病,只要有病就用抗生素。

 (2）无论什么感染,都用广谱抗生素。

 (3）无论疾病性质,大都用静脉注射,而且剂量过大,疗程过长。

 (4）不考虑抗生素的抗菌特点,随意联合使用。

 (5）使用一些在儿童期禁用、慎用或已被淘汰的药物。

 (6）与其他药物如病毒唑、维生素等混合在较大量的液体中静滴。wWW.meiword.coM

 2  滥用的不良后果

 滥用抗生素可导致儿童体内耐药菌株产生,引发难以治愈的感染性疾病。大量耐药菌的产生,使难治性感染越来越多,导致病菌感染的机会越来越多,治疗感染性疾病的费用越来越高。据报道耐青霉素的肺炎链球菌,过去对青霉素、红霉素、磺胺等药品都很敏感,现在几乎“刀枪不入”。绿脓杆菌对氨苄西林、阿莫西林、西力欣等8种抗生素的耐药性达100%,肺炎克雷伯氏菌对西力欣、复达欣等16种高档抗生素的耐药性高达52%-100%。而耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌除万古霉素外已经无药可治。

 3  合理使用抗生素的原则

 必须掌握适应证并遵循安全、有效和经济的原则。

 (1）病毒性疾病或估计是病毒性的不宜用,如普通的上呼吸道感染、轮状病毒性肠炎等。

 (2）发热原因不明者不宜用,应尽早确诊后再对因治疗。

 (3）对细菌感染患儿,选用适宜抗生素,适当的剂量和疗程,合适用药途径和合理的间隔时间,同时必须采用各种综合措施。①给药途径:应根据感染严重程度及药物动力学特点决定给药途径,轻症感染尽量选用生物利用度高的口服制剂;②有多种药物可供选用时,应以窄谱,不良反应少,价廉者优先。 

注意剂量和间隔时间;③抗菌药物的更换:一般感染用药72h(重症48h)后可根据疗效,决定是否需要更换抗生素;④疗程一般感染待症状体征及实验室检查明显好转或恢复正常后再用药2-3 d,特殊感染按特定疗程执行。        (4）尽量避免皮肤黏膜局部用药,不允许擅自将全身用药制剂局部使用。

 (5）预防性用药应严格掌握指征,儿科在以下情况下可考虑预防给药:①风湿病:用苄星青霉素预防,儿科剂量60-120万u,每月1次;②流行性脑膜炎:对密切接触者常用磺胺嘧啶，磺胺甲基异唑co3日;③密切接触开放性结核患者的儿童用异烟肼3个月;④烧伤患者手术前后用药2-3d;⑤外科手术:于麻醉时用一种抗生素静脉注入,可预防手术后细菌感染并发症;⑥婴儿室中出现细菌感染流行,按病原菌用药预防。

 4  常见病抗生素的合理使用

 儿童腹泻和感冒是目前最常见的滥用抗生素疾病。儿童腹泻病因较多，尽管感染是主要原因,但病原有细菌、病毒、真菌等,抗生素只对细菌感染有效。抗生素的长期应用会导致肠道菌群紊乱,使腹泻加重或迁延不愈。其实,婴儿腹泻的病因除喂养不当外,主要是通过粪便传播使其感染了一种特殊的病毒-轮状病毒。由轮状病毒感染引起的腹泻使用抗生素无济于事。因此,确诊为轮状病毒肠炎,不必使用抗生素,只需注意对症处理。该病病程短,可以自愈。抗生素仅适合于侵袭性肠道细菌感染,如志贺痢疾杆菌、沙门菌等。对于大便中混有黏液血便,大便镜检白细胞明显增多,伴有腹疼里急后重者需要用抗生素。轻型患儿可选用黄连素、庆大霉素口服,重症者选用氨苄青霉素静滴。一旦出现肠道菌群紊乱或继发真菌性肠炎时,应停用抗生素,给以微生态制剂。儿童病毒性感冒是一种急性感染性疾病,具有自限性,通常病程3~7d,病毒性感冒的治疗没有特效药可缩短病程。

 5  儿童不宜使用的抗生素

 (1）氨基糖苷类抗生素,都有轻重不等的耳毒性和肾毒性,尤其是耳毒性,可引起永久性耳聋。

 (2）四环素类抗生素,能与新生长牙齿中的钙结合形成黄色结合物沉着,俗称“四环素牙”。此类药物还能与骨中的钙结合抑制婴儿的骨骼生长。故8岁以下儿童禁用。

 (3）氯霉素早产儿和新生儿应禁用,儿童慎用。

 (4）磺胺类药物早产儿和新生儿应慎用。因此类药物能引起早产儿和新生儿黄疸、粒细胞减少等。

 (5）喹诺酮类,12岁以下的儿童禁用,18岁以前慎用。

 (6）第一代头孢菌素儿童不可大剂量使用。因为此类药物肾毒性较大,可引起小儿血尿、肾组织坏死。

 总之，选择抗生素时要全面考虑患儿的感染情况、生理状态、病理状态,合理选用药物的品种、使用剂量、用药时间以及给药途径。有效控制感染,减少药物不良反应,防止人体内菌群失调,减少耐药性的产生。

参 考 文 献

[1]金有豫.药理学.卫生出版社,20xx:308~312.

[2]诸福棠.实用儿科学.卫生出版社,1995.

对我国传统药物知识内涵的认识_药学论文 第四篇

           作者：梅智胜,肖诗鹰,黄璐琦,刘铜华

  传统药物；传统知识

迄今为止,学术界对我国传统药物知识尚未有明确的定义。笔者现根据一些国际组织对传统知识所确定的概念并结合国内学术界的研究成果,对我国传统药物知识的内涵作一探讨。

1  世界知识产权组织(wipo)的观点

wipo关于传统知识所确定的概念是：基于传统之上的文学、艺术或者科学作品、表演、发明、科学发现、设计、商标、名称和符号、未被透露的信息和所有其他一些在工业、科学、文学或艺术领域,由智力活动产生的基于传统之上的创新和创造。例如,农业知识、科学知识、医药学知识、生物多样性有关的知识、民间文学艺术作品、语言的要素、未固定的文化财产等。“基于传统的”,是指某种知识体系创造、创新和文化表达方式,通常是代代相传,为某个特定民族或其居住地域所固有,并且随着环境变化而不断演进。wipo进一步指出,所谓“传统知识”,并不是因为其古老,许多传统知识并不古老或呆滞没有生气,而是当今社会许多现代生活中非常重要而有活力的部分。这是一种与某一社会具有传统联系的知识,它在一个传统社会中产生、延续、代代相传,有时是通过知识传递的特定习惯性体制。wwW.meiword.CoM一个社会可把传统知识看作是其文化身份或精神特性的一部分,所以是它与社会的这种关系使其成为“传统”知识。传统知识每天都在被创造出来,并在个人和社会回答社会环境提出的挑战的过程中得到发展。传统知识的当代特征更进一步证明了对其进行法律保护的正确性。制订保律以记录并保存可能已经濒临灭绝的过去所创造的传统知识不仅是可取的,而且同样重要的是,对于传统知识体系的持续使用中产生的新的传统知识,要考虑如何尊重并保持其发展和传播；另外,一些传统知识与植物和其他生态资源密切联系,例如草药等。传统知识经常为研究人员提供线索,使其能从生物资源中提取有价值的活性成分。这种遗传和生物资源是通过一代又一代对资源的利用和保护以及在现代科学研究中的共同使用而与传统知识和惯例相联系起来的。传统知识的保护经常与生物多样性的保护密切联系,特别是根据《生物多样性公约》进行的保护。

2  传统知识的基本特征

根据上述国际组织对传统知识的阐述,并参考国内学者的研究成果,笔者将传统知识的基本特征归纳为以下几点。

2.1  传统性

传统知识是特定群体在长期历史生活同创造和发展的,传统知识的大部分是由那些在过去的年代已经形成的知识构成。但“传统”并不绝对意味着相关的知识来自古代,传统知识中的传统是指获得知识及使用的方式不同于当地人从近现代科学中获得的知识；同时,传统知识也并不是静止不动的,而是在不断地保持着确认、适应和创造的连续过程,随着社会环境和自然环境的变化而不断演变。

2.2  群体性

传统知识的产生及其发展不是靠单个社会成员的努力而完成的,而是由其所在的群体甚至相关联的多个群体在长期的生产与生活同完成,且世代连续努力、共同创造的成果,是群体智慧的结晶。这个特征导致传统知识的权利主体往往不易确定。

2.3  传承延续性

传统知识是在长期的历史过程中自然延续下来,与一个地区、一个民族生产与生活方式的自然演进一同进步和发展,经当地人世代相传的知识。传统知识的传承延续性还在于其保持了鲜明的传统特色,且不符合现代技术标准与法律标准,通常没有固定形式。这更说明了传统知识并不是僵化的,是其群体成员自然承袭和发展的知识,与其生产及生活活动相伴,永远处于不断自我完善的过程中,属于可延续下去的知识。

2.4  相对公开性

传统知识是由其所在的群体甚至相关联的多个群体在长期的生产与生活活动同完成的,对于特定群体而言,传统知识与群体的生活自然相伴,没有刻意的保密制度或措施。传统知识是公开的,但对其他的群体而言,此类知识是“神秘的”,不公开的。

2.5  权利主体多元性

传统知识是特定群体共同创造、共同掌握、共同拥有的。传统知识具有相对公开性和权利主体多元性,并不意味着每一个群体成员都能掌握和运用,某些传统知识可能需要专门的智慧和技能方可加以运用。

2.6  与生态资源紧密性

某些传统知识与生态资源密切联系,一旦生态资源遭到破坏,这类传统知识的价值就会褪色甚至灭绝。

2.7  明显的地域性

传统知识是特定群体在应对生存环境过程中逐渐产生和发展起来的知识,这种知识的产生、发展与特定的自然环境和人文环境密切相联,已经成为当地生活不可分割的组成部分,一旦离开其产生发展的土壤,传统知识可能不复存在。

2.8  保护时间上的无限期性

传统知识的保护期则应是无限期的,其原因在于其在时间上的续展性和主体的不确定性,很难认定它的保护期的起始点和终结点,从而体现出历史的传承和积淀。

　3  对我国传统药物知识内涵的认识

据世界卫生组织(who)的定义,传统医药是人类在长期实践和探索中以理论、信仰和经验为基础,以不同文化为背景,无论可否解释,逐步形成的保健和疾病预防、诊断、改善、治疗的知识、技能和实践的总称。

基于上述精神,笔者认为,我国传统药物知识应该包括我国行政区域内各民族历代传承和积累以及今后通过经验可能新发现对自然界动物、植物、微生物及矿物等具有预防和治疗疾病作用的认识,具体而言,包括各民族具有系统理论的药物知识以及民间的草药知识等,即包括迄今为止各民族遗留下来有记载和口传心授的处方、饮片炮制技术、药材生产技术和药用资源等,而其中药用资源应包含《生物多样性公约》所界定的“生物资源

(biological resources)”,即对人类具有实际或潜在用途或价值的遗传资源、生物体或其部分、生物种群、或生态系统中任何其他生物组成部分。该含义中的“遗传资源(genetic resources)”是指具有实际或潜在价值的遗传物质；而“遗传物质(genetic material)”则是指来自植物、动物、

微生物或其他来源的任何含有遗传功能单位的材料。

国内有学者主张把生物资源与传统知识分开[2]。认为虽然与生物资源的保存与利用有关的很多知识都可归为传统知识,但无论如何,生物资源本身很难被归入传统知识之中。因为生物资源本身作为一种自然形成并生长的生物物种,其发现者或利用者很难主张有自己的“知识”隐含于其中,并因而能够对它主张独占的权利。且举例说,虽然李时珍发现或辨别了很多中草药物种,并将其知识汇编成《本草纲目》,但他却很难对其中的物种主张独占的权利。原因是：发现者既不能论证其独占具有合理的法理基础,也不能保证其占有或使用是事实上排他性的占有和使用。而且依据wipo报告,强调只有南太平洋地区的少数接受调查者表示应保护与其传统科技知识(包括传统农业、医药和生态知识等)相关的生物资源；其他大部分地区的接受调查者仅表示关注对与生物资源相关的“传统知识”(包括利用方法等)的保护。

但传统知识的创造和运用与生物资源密切相关。从全球范围来看,传统知识的创造者和持有者都生存在与自然界息息相关的生态环境中,绝大多数传统知识的创造、保存和创新都要依赖于其生态环境的完整和生物资源的富足。因此,人们既可通过运用传统知识达到对生物资源的认识和利用,也可反过来通过保护和利用生物资源以维护传统知识的保存、保护和创新。传统知识和生物资源之间的这种相互依赖的辩证关系,对于可持续发展来说现实意义尤为鲜明。我国传统药物知识就是其中的典型代表。就我国传统医学而言,其实际运用最终都要落实在以天然动植物、微生物以及矿物等(即药材)作为治疗手段,而目前对药材的开发也多基于传统医学对它的理论认识和使用经验。在传统医学理论指导下的具体应用,药材已不再是单纯的自然之物,而负载有性质、功效、临床应用等信息,成为我国传统药物知识的重要组成部分。如青蒿是菊科蒿属植物,广布于世界北温带许多国家和地区,但只有中医有用于治疗疟疾的经验；我国东西南北都产,但只有少数地区青蒿的青蒿素含量高、杂质少,具有工业生产价值；蒿属几百种植物除青蒿外,尚未发现其他种含有青蒿素；蒿属植物乃至菊科中数以千计的各类化学成分,尚未发现青蒿素以外的成分具有抗疟作用[3]。

总之,笔者认为,如果不包括生物资源在内,我国传统药物知识的内涵将是不完整的,并对今后相关的立法和保护措施产生不利影响。

符 颖,冯晓青.论传统知识寻求知识产权保护的正当性[eb/ol]. www.chinalawedu.com/news/20xx/7/li4465893311750022432.html,20xx-10-03.

[2] 刘银良.传统知识保护的法律问题研究[eb/ol].www. kakabook.net/lunwen/law/mingfa/20xx/11/0322341177.html,20xx-

10-07.

[3] 胡世林,许有玲.纪念青蒿素诞生30周年[eb/ol].www.cntcm. com.cn/2343-b.htm,20xx-10-07.

浅述山楂的药用食用价值_药学论文 第五篇

 山楂来源于蔷薇科植物山里红或山楂的干燥成熟果实。山楂既是一味常用的中药，更是一种常见的水果，是我国特有的药果兼用树种。

 1  性能功效

 山楂味酸、甘、性微温，归脾、胃、肝经，具有消食化积、行气散瘀之功效。能够治疗：（1）肉食积滞证。（2）泻痢腹痛，疝气痛。炒用兼能止泻止痢。（3）瘀阻胸腹痛、痛经。（4）冠心病，高血压症，细菌性痢疾。

 2  药理作用

 2.1帮助消化  山楂含柠檬酸、山楂酸、熊果酸等多种有机酸，口服后能促进胃液的分泌，增加胃液酸度，提高胃蛋白酶活性，促进蛋白质的消化。山楂中所含的脂肪酶能促进脂肪的消化。山楂对胃肠运动功能具有一定的调节作用。

 2.2对心血管系统的作用  山楂的主要成分是黄酮类物质, 对心血管系统有明显的药理作用：（1）抗心肌缺血；（2）抗心率失常；（3）强心；（4）降压。WWW.meiword.Com

 2.3调节脂质代谢  山楂及山楂总黄酮能显著抑制高脂高胆固醇。喂饲大鼠血清总胆固醇、低密度脂蛋白-胆固醇和apob浓度，显著升高高密度脂蛋白—胆固醇和apoa1浓度,但对甘油三酯影响不大。山楂对肝细胞微粒体及小肠黏膜胆固醇合成的限速酶有抑制作用，但对肝脏胆固醇分解限速酶无明显影响。山楂对兔实验性动脉粥样硬化有治疗作用，可使主动脉斑块面积减少，眼球脂质斑块沉着明显减轻，主动脉、冠状动脉病变也减轻。

 3  食疗作用

 由于山楂富含多种有机酸，能保持山楂中的维生素c，即使在加热的情况下，也不致被破坏，所以，制成山楂糕等制品后，维生素c仍能保存。山楂还富含胡萝卜素、钙、齐墩果酸、鸟素酸、山楂素等三萜类烯酸和黄酮类等有益成分，能舒张血管，加强和调节心肌，增大心室和心运动振幅及冠状动脉血流量，降低血清胆固醇和降低血压；此外，山楂对心脏活动功能障碍、血管性神经官能症、颤动性心律失常等症也有辅助治疗作用；山植还含有槲皮苷，它有扩张血管、促进气管纤毛运动、排痰平喘之功能，故山楂是防治心血管病的理想保健食品和有较好疗效的食品，近来应用于高血压、高血脂、冠心病等的防治，均有较好效果。山楂中含有的牡荆素等化合物具有抗癌作用，常用山楂有利于防癌。伤风感冒、消化不良、食欲不振者，食用山楂及其制品很有效果。

 山楂中果胶含量居所有水果之首，达6.4%，而果胶，据最新研究，它有防辐射物质的作用，能从体内带走一半的放射性元素(锶、钴、钯等)。果胶还有吸附和抗菌性质，可从肠子上去除细菌、毒素并束缚住水分，因此，可治泻肚。

 山楂中还含有丰富的钙和胡萝卜素，钙含量居水果之首，胡萝卜素的含量仅次于枣和猕猴桃，最适于小儿食用。

 山楂可单味或与其他食物、药物配伍以提高其食疗作用。如山楂片、果丹皮、山楂糕等都有强心、降血压、降血脂、柔和血管、促进消化等功能，是动脉硬化、消化不良和缺少胃酸患者的理想食品。山楂单味加红糖制成独圣散，可活血化淤、促进食欲、帮助消化，适用于产后淤血、停阻的儿枕痛。

 山楂加糯米制成山楂粥，能开胃消食、化滞消积、活血化淤、收敛止痢，适于食积腹胀、消化不良、腹痛泄泻患者食用。 

 4  应用举例

 (1）山楂粥治疗高血压

 原料:山楂30～40克，粳米100克，砂糖10克。

 制法:先将山楂入砂锅煎取浓汁，去渣，然后加入粳米、砂糖煮粥。

 用法:可在两餐之间当点心服食，不宜空腹食，以7～10天为一疗程。

 (2）山楂汤

 原料：山楂500克，白糖200克，可依自己口味酌量增加。        制法：以水清洗山楂，去蒂、籽用水煮，煮之8成熟将水倒出重新加水，并加糖。将山楂煮开花后即可食用。

 (3）山楂茶

 原料：山楂500克，干荷叶200克，薏苡仁200克，甘草100克。

 制法：将以上几味共研细末，分为10包，每日取1包沸水冲泡，代茶饮，茶淡为度。

 (4）健美消脂茶

 原料：山楂20克，泽泻、莱菔子、麦芽、茶叶、藿香、赤大豆、云茯苓、草决明、陈皮、六神曲、夏枯草各7克。

 制法：将以上各味入砂锅中加水煎熬，滤汁饮用，为一日量。（脾胃虚弱者慎服）

 (5）健美消脂茶

 原料：生山楂、生首乌、夏枯草、泽泻、莱菔子、茶叶各10克。

 制法：将以上各味同入砂锅加水适量煎煮，滤汁饮用，为1日量。（脾胃虚弱者慎服）

 (6）山楂降压汤

 原料：猪肉(瘦)200克 辅料：暂无 调料：姜5克,大葱10克,盐2克。

 制法：1.将山楂洗净，如果是山楂果，拍松；2.将猪瘦肉去血水，洗净后切成4厘米长、2厘米宽的块；3.姜拍碎，葱切成段；4.将锅置中火上烧热，加入素油烧热至六成熟时，放入姜末、葱段爆香；5.加入鸡汤，烧沸后加入猪肉、山楂、盐，用文火炖50分钟即成。

 5  注意事项

 (1）山楂不能空腹吃。

 (2）少吃生山楂。

 (3）孕妇、儿童、胃酸分泌过多者、病后体虚及患牙病者不宜食用。

 (4）山楂不宜与海鲜、人参、柠檬同食。

 (5）儿童正处于牙齿更替时期，长时间贪食山楂或山楂片、山楂糕，对于牙齿生长不利。所有人食用山楂都不可贪多，而且食用后还要注意及时漱口，以防对牙齿有害。

 (6）山楂具有降血脂的作用，血脂过低的人多食山楂会影响健康。

中药应用剂量的把握_药学论文 第六篇

 中药的剂量是临床医生根据患者病情确定的一日用药量，是药品标准下收载的内容之一，医生和药剂人员必须准确掌握中药的剂量，才能取得应有的疗效。中医治疗疾病的过程就是理、法、方、药的临床实践过程，以疗效为评价标准并受中药剂量等多种因素影响，因此，治疗过程中正确把握中药剂量是至关重要的，笔者从中药产地对剂量的影响等三方面讨论如下：

 中药产地对剂量的影响。传统对产于某“道”或某“地”的产量大、质量优的中药称为“道地药材”。“道地药材”由于独特的产地、生境条件以及生长过程中秉受各种自然因素的影响，具有独特的优良品质。如道地黄连以产于四川洪雅，雅安，峨眉者最为著名，故有川连、雅连之称，又以条粗壮，质坚实、断面红黄色者佳。枸杞以宁夏中宁所产者为道地药材，又以粒大、色红、肉厚、质柔润、粒少，味甜者为佳。砂仁以产于广东阳春的东山，蟠龙山，金花坑等处者，市场上习称“蟠龙正春砂”，冠于其它砂仁之上为优质品，又以个大，坚实、仁饱满、气味浓者为佳。其它如“四大怀药”“浙八味”等中药都是著名的“道地药材”，习称上品。中药产地对剂量的影响体现在中药质量与剂量的关系上，在用药剂量上遵循质优者用量小，质次者用量大的原则。 

药品标准中收载的中药剂量就是“道地药材”临床治疗疾病的一日常用量。

 中药所含有效成分的变化对剂量的影响。wWW.meiword.COm某些中药中有效成分的含量直接影响其疗效，因而在临床上应正确调整剂量已取得应有的疗效。如苦杏仁味苦、辛，性温、有小毒；入肺、大肠经；有止咳平喘、润肠通便之功；其所含苦杏仁苷既是有效成分，又具有一定毒性，临床应用根据有效成分的含量并通过合理炮制确定合适的剂量配方入药，药煮过程中苦杏仁苷分解后产生微量氢氰酸，患者服用后通过镇静呼吸中枢发挥止咳平喘作用。苦杏仁苷分解后所产生的氢氰酸毒性较大，如用量过大，可引起呼吸麻痹等不良反应，甚至引起中毒。因此剂量对临床疗效有显著影响，若用量不及则难达到治疗目的，太过则易致不良反应。

 中药加工炮制对剂量的影响。中药在临床就用前都要经过一定的加工处理，称为炮制。中药经过炮制可以发挥增强疗效，降低毒性的作用，便于临床应用等目的。由于中药炮制后某些中药的活性成份或有毒成份的含量有所变化，其用药剂量亦应有所变化。如马钱子中所含的士的宁，既是该药的活性成份又是有毒成份，传统炮制用砂烫或油炸法使马钱子中所含的士的宁通过高温部分分解，达到合理控制剂量保证用药安全的目的；近来研究通过测定生马钱子中士的宁的含量，将生马钱子粉碎后加入一定量的稀释剂混匀使士的宁的含量控制在一定的范围，可以达到节省药材、合理控制剂量、保证用药安全的目的。

 影响中药剂量的因素还有很多，如方剂配伍对剂量的影响，年龄、性别、个体差异对剂量的影响，给药途径、煎服方法、生长环境、季节气候等对中药剂量均有一定影响，临床上在辩证施治、处方用药时要以整体观念为指导，综合考虑上述因素，才能达到应有的治疗目的。

天麻头风灵胶囊的质量标准研究_药学论文 第七篇

  目的 建立天麻头风灵胶囊的质量标准。方法 采用高效液相色谱法测定天麻头风灵胶囊中天麻素的含量。选用kromasil c18柱(250 mm×4.6 mm,id),以甲醇-0.05%磷酸水(2.5∶97.5)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长220 nm。采用薄层色谱法对天麻头风灵胶囊进行定性鉴别。结果 天麻素在6.016～96.256 μg/ml范围内,浓度与峰面积线性关系良好(r=0.999 9),加样回收率为100.02%,相对标准偏差rsd为2.24%。薄层定性实验方法简便灵敏、专属性强,天麻头风灵胶囊中4种被鉴别的成分均能显示特征斑点。结论 本方法操作简便,结果可靠,重现性好,可用于天麻头风灵胶囊的质量控制。

  天麻头风灵胶囊；质量标准；高效液相色谱法；薄层色谱法

abstract：objective to establish a quality control for tianmatoufengling capsule. methods hplc method was taken for the determination of gastrodine in tianmatoufengling capsule, a kromasil c18 column was used, with methanol 0.05% calcium phosphace (2.5∶97.5) as the mobile phase, and its flow rate was

1.0 ml/min. the detection wavelength was 220 nm. tlc method was used for the identification of tianmatoufengling capsule. results under the used chromatographic condition, tianmatoufengling had fine linear responses (r=0.999  9) in the concentration range of 6.016～96.256 μg/ml, the average recovery was 100.02%, rsd was 2.24%. the method used in tlc-qualitative ysis was simple and sensitive with high specificity, four ingredients identified in tianmatoufengling capsule could be detected and all showed specific spots. conclusion the method employed in this study was convenient and reliable with good repetition. it can be used for quality control in production of tianmatoufengling capsule.

key words：tianmatoufengling capsule；quality control；hplc；tlc

天麻头风灵胶囊由天麻、川芎、玄参、当归、地黄、槲寄生、野菊花等10味中药组成,具有平肝潜阳、清眩止痛、补益肝肾、息风止痉、镇静、镇痛和抗炎作用。www.meiword.CoM为了有效控制本品质量, 我们对天麻等4味中药进行了薄层鉴别,并采用高效液相色谱法对方中君药天麻的有效成分天麻素进行了含量测定。对天麻素的测定,文献报道的方法有二阶导数光谱法、三阶导数分光光度法[2]、双波长薄层扫描法[3]、高效液相色谱法[4]等。我们选择天麻素为指标性成分,建立了测定天麻头风灵胶囊中天麻素含量的高效液相色谱法,取得了较好的结果。

　1  仪器与试药

waters 高效液相色谱仪系统515泵；717自动进样器；2487紫外检测器；millennium 32色谱管理系统。sartorius bp211d型电子天平；瑞士camag ⅲ型薄层色谱系统。天麻素对照品(中国药品生物制品检定所,批号110715- 20xx12)；天麻头风灵胶囊(自制,批号040613,040614, 040615)。甲醇(色谱纯),磷酸(纯),重蒸馏水(自制)。

2  方法与结果

2.1  薄层色谱鉴别

2.1.1  天麻

取本品10片,研细,加水饱和的正丁醇50 ml,浸泡一夜,超声处理30 min,滤过,滤液用水30 ml分3次振摇提取,合并水层,浓缩至5 ml。通过d-101大孔树脂柱(内径1.5 cm,长12 cm),以水15 ml洗脱,弃去水液,再用10%乙醇40 ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加甲醇1 ml使溶解,作为供试品溶液。取天麻素对照品,加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液,作为对照品溶液。取天麻对照药材0.5 g,加甲醇5 ml,超声处理30 min,滤过,滤液作为对照药材溶液。阴性制剂溶液的制备方法同供试品溶液的制备方法。

照薄层色谱法[5]试验,分别吸取阴性制剂溶液、对照品溶液、对照药材溶液及供试品溶液各10 μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以氯仿-甲醇-冰醋酸(12∶4∶0.5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%磷钼酸-乙醇溶液,在105 ℃加热至斑点显色清晰,日光下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同的棕褐色斑点。阴性制剂无此斑点。

2.1.2  当归、川芎

取本品25片,研细,加乙醚20 ml浸泡1 h,超声处理30 min,滤过,滤液挥干,残渣加氯仿1 ml使溶解,作为供试品溶液。取当归、川芎对照药材各0.5 g,同法制成对照药材溶液。阴性制剂(缺当归、川芎)溶液的制备方法同供试品溶液制备方法。

照薄层色谱法[2000年版《中国药典》(一部)附录ⅵb] [5]试验,吸取缺当归、川芎的阴性制剂、供试品溶液20 μl、当归、川芎对照药材溶液各1 μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以正己烷-乙酸乙酯(9∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。同缺当归川芎的阴性制剂无此斑点。

2.1.3  野菊花

取本品制剂10片,研细,加甲醇15 ml,超声处理30 min,取上清液,作为供试品溶液。取野菊花对照药材0.3 g,同法制成对照药材溶液。阴性制剂溶液的制备方法同供试品溶液的制备方法。

照薄层色谱法[2000年版《中国药典》(一部)附录ⅵb][5]试验,吸取阴性制剂溶液、供试品溶液2 μl及对照药材溶液1 μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以乙酸乙酯-丁酮-氯仿-甲醇-水(15∶15∶6∶4∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以三氯化铝试液,晾干,置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。阴性制剂无此斑点。

2.2  天麻素的含量测定

2.2.1  色谱条件和系统适应性试验

色谱柱：kromasil c18反相柱(250 mm×4.6 mm,id)；流动相：甲醇-0.05%磷酸水(2.5∶97.5)；柱温：30 ℃；流速：1 ml/min；测定波长：220 nm；进样量：20 μl。在上述色谱条件下测定,天麻素达到基线分离,理论塔板数按天麻素峰计算大于5 000。

2.2.2  对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液的制备

精密称取在80 ℃减压干燥1 h的天麻素对照品适量,加甲醇制成每1 ml含25 μg的溶液,即得对照品溶液。取本品20片,研细,取粉末0.5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇10 ml,称定重量,超声处理30 min,放冷,再称定重量,用50%甲醇补足减失的重量,滤过,取续滤液,即得供试品溶液。取缺天麻的阴性制剂,同供试品溶液的方法制备,即得阴性制剂溶液。

2.2.3  空白干扰试验

照上述色谱条件,取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各20 μl,分别注入色谱仪。供试品色谱图中,在与对照品色谱图相应的位置上,有一相同的色谱峰,而阴性对照溶液在此保留时间无色谱峰出现,故对供试品溶液含量测定无干扰,见图1。

2.2.4  标准曲线及线性范围

取天麻素适量,精密称定,加50%甲醇制成300.8 μg/ml的标准贮备液,从中精密吸取0.2、0.4、0.8、1.6、3.2 ml分别稀释至10 ml,摇匀,分别吸取20 μl对照品溶液注入液相色谱仪测定。经回归,得回归方程： a=38 236c-3 498.9,相关系数r=0.999 9,线性范围6.016～96.256 μg/ml。

2.2.5  进样精密度试验

取对照品溶液20 μl(24.064 μg/ml)注入液相色谱仪测定,连续6次,结果平均值a=914 106, rsd=0.09%。表明精密度较好。

2.2.6  稳定性试验

取供试品溶液(批号040613),每隔2 h精密吸取20 μl注入液相色谱仪,测定样品12 h的稳定性。结果表明,供试品溶液在12 h内稳定,结果rsd=0.63%,表明被测物稳定。

2.2.7  重复性试验

配制供试品溶液(批号040613)共5份,分别吸取20 μl溶液注入液相色谱仪测定,结果平均值为0.469 mg/g,rsd=0.84%,表明本法的重复性较好。

2.2.8  加样回收率试验

取批号040613天麻头风灵分散片,研碎的粉末约0.25 g,精密称定,共6份,分别精密加入300.8 μg/ml天麻素对照品溶液0.32、0.32、0.4、0.4、0.48、0.48 ml,混匀后,分别加入50%甲醇9.68、9.68、9.6、9.6、9.52、9.52 ml,称定重量,超声处理30 min,放冷再称重,用50%甲醇补足减失的重量,滤过,取续滤液,即得。分别吸取20 μl溶液注入液相色谱仪测定,结果见表1。表1  加样回收率试验结果（略）

2.2.9  样品含量测定

分别精密吸取供试品溶液20 μl,注入液相色谱仪中进行测定,结果见表2。根据3批样品检验结果,标准中暂定为每片含天麻以天麻素(c13h18o7)计,不得少于0.20 mg。表2  样品含量测定结果（略）

　3  讨论

3.1  检测波长的选择

经对天麻素对照品进行紫外扫描,发现天麻素在270 nm和220 nm处有较大吸收,其中220 nm为最大吸收波长。当检测波长为270 nm时,杂质干扰较小；当检测波长为220 nm时,杂质干扰较大。但综合各种因素考虑决定选用220 nm为检测波长。

3.2  流动相的选择

实验曾分别比较了不同比例的甲醇-水-磷酸流动相的色谱行为,考虑到色谱峰的对称性以及时间的合理性,选择甲醇-0.05%磷酸水(2.5∶97.5)为流动相,样品分离较佳。

3.3  样品预处理方法的选择

实验考察了超声提取和加热回流提取两种提取方法,结果表明,超声提取效果更好；进一步对超声提取时间进行考察,发现超声处理30 min(工作频率40 khz,超声功率250 w),样品天麻素已基本溶出。实验还比较了不同提取溶剂(甲醇、50%甲醇、流动相和亚沸蒸馏水)和不同提取次数对结果的影响,结果表明水和50%甲醇提取效果相当,结合色谱行为,选用甲醇提取；且超声一次就能达到含量测定要求。

何丹鸿,陈 曦.二阶导数光谱法测定复方天麻制剂中天麻素含量[j].辽宁药物与临床,1998,1(4)：160－161.

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[3] 申玉华,董文慧.双波长薄层扫描法测定天芎头痛宁胶囊中天麻素的含量[j].中药新药与临床药理,1995,6(3)：33－35.

[4] 梁纪军,田大丰.hplc法测定不同产地天麻中天麻素的含量[j].沈阳药科大学学报,20xx,23(1)：26－28.

[5] 国家药典委员会.中华共和国药典(一部)[s].：化学工业出版社,2000.78.

金耳菌丝体抗凝血有效部位初筛_药学论文 第八篇

  目的 筛选金耳菌丝体抗凝血的有效部位。方法 采用系统溶剂法处理金耳菌丝发酵物,得乙酸乙酯部位、正丁醇部位及水溶部位,通过凝血酶原实验、小鼠凝血实验及小鼠体内血栓形成实验等来筛选具有抗凝血作用的有效部位。结果 金耳菌丝体的正丁醇部位表现出较好的抗凝血作用,乙酸乙酯部位及水溶部位表现出微弱的活性。结论 金耳菌丝体抗凝血的有效部位为正丁醇提取部位。

  金耳；菌丝体；抗凝血

abstract：objective to study the effective anticoagulant components of the fermented products of mycelium from tremella aurantialba 9800. method to adopt system menstruum deal with fermented products of mycelium from tremella aurantialba, then mycelium from tremella aurantialba was studied with the clotting time of the thrombogen, the whole blood clotting time in mice and thrombosis experiment in mice. result butanol extract of fermented products of mycelium from tremella aurantialba behave anticoagulant function. ethyl acetate extract and water extract also behave feeble activity. conclusion the effective anticoagulant components of the fermented products of mycelium from tremella aurantialb is butanol extract.

key words：tremella aurantia；mycelium；anticoagulant

金耳(tremella aurantia)又名黄金银耳、黄木耳、金木耳、黄耳、脑耳、胶耳等,是一种稀有野生名贵食、药用菌。WWw.meiword.COm分类地位属担子菌纲,银耳目,银耳科,银耳属,是银耳的近缘种,其生物学特性有许多相似之处,具有较高经济价值。据《中国药用真菌》记载,金耳性温中带寒,味甘,能化痰、止咳、定喘、调气、平肝肠,主治肺热、痰多、感冒咳嗽、气喘、高血压等。经对其进行深层发酵研究,发现菌丝发酵产物与原子实体相比无论成分与药用价值,前者均具有很大的应用价值。刘氏等[2]以小白鼠血栓形成和大鼠脑脂质过氧化物等为指标,研究了金耳菌丝全发酵产物的抗凝血及抗血栓形成作用,对金耳菌丝发酵产物防治缺血性脑中风,治疗脑梗死、脑缺氧导致的肌力丧失、手足麻木、意识不清等症进行了初步的探索,但还需继续深入研究该产物的有效部位,进一步确定其物质基础及其药理作用机制。因此,我们采用系统溶剂法将金耳菌丝发酵产物分为若干提取部位,以几个提取部位为研究对象,通过抗凝及抗血栓形成等实验,深入探讨其抗凝血的有效部位。

　1  实验材料

1.1  动物

昆明种小鼠,体重(22±0.89)g,雌雄各半；wistar大鼠,体重(261±1.56)g,雌雄各半,均由中国医学科学院实验动物中心提供,合格证号(95)01-3008。

1.2  药物

金耳9800菌丝发酵物(简写为tm),采用山西省生物研究所自主分离驯化的金耳9800菌种发酵制得,批号20xx0511。

1.3  试剂与仪器

dade ci-trol 1(德灵试剂),dade behring公司,批号060512；乌拉坦,上海化学试剂采购供应站经销,批号990309；羧甲基纤维素钠(cmc-na),河北省蓝博化工厂生产,批号050816；其它化学试剂均为国产纯。ca-50自动血凝仪；旋转蒸发仪re-52a(上海亚荣生化仪器厂)。

　2  实验方法

2.1  金耳菌丝体发酵物各部位的提取与分离

称取干燥菌丝体,分别用12倍量、10倍量70%的乙醇提取2次,每次2 h,过滤,滤液减压回收乙醇,以水混悬,用石油醚脱脂,后分别用乙酸乙脂、正丁醇萃取5次,减压回收乙酸乙酯、正丁醇,冻干,分别得乙酸乙酯提取部位、正丁醇提取部位、水溶性部位,冷藏备用。用时以1%的cmc-na溶液混悬成不同浓度供药理筛选。

2.2  各提取部位对凝血酶原作用的影响

乌拉坦(1.5 g/kg)麻醉大鼠,固定,分离腹主动脉取血(3.8%枸橼酸钠抗凝)。离心分离血浆。受试药物分别制成终浓度为100 mg/ml(高剂量组)、50 g/ml(低剂量组)的溶液。每管血浆0.045 ml,加入不同浓度的受试药物0.05 ml ,致凝剂(德灵试剂)0.10 ml,总体积为0.15 ml。于血凝仪上测定其凝血酶原时间,等量生理盐水作空白对照。记录凝血酶原时间。

2.3  各提取部位对小鼠体内血栓形成的影响

取小鼠70只,随机分为7组,10只/组,ig给药3 d,高剂量组1.0 g/(kg·d),低剂量组0.5 g/(kg·d),于最后一次给药1 h后,尾静脉注射配制好的鼠脑粉试剂0.1 ml/10 g,待小鼠出现呼吸困难、惊厥、小便失禁、直至死亡,存活者按5 min计,记录小鼠存活时间及死亡率。

2.4  各提取部位对小鼠全血凝血时间的影响(毛细玻管法)

取健康小鼠70只,随机分成7组,每组10只,ig给药3 d,第3天给药1 h后,用内径为1 mm的玻璃毛细管插入小鼠眼球后静脉丛取血,至毛细管内血柱达5 cm,将毛细玻管平放于桌上,每隔30 s,折断毛细玻管约0.5 cm,缓慢左右拉开,检查有无出现血凝丝。记录从血液流进管内至出现血丝的时间,即为凝血时间。

2.5  统计学方法

数据以x±s表示,统计学检验采用组间t检验进行处理。

　3  结果

(见表1～表3)  表1  金耳菌丝发酵物各提取部位对小鼠凝血酶原的影响(略)注：与生理盐水组比较,p<0.05,p<0.01(下同)。表2  金耳菌丝发酵物各提取部位对小鼠体内血栓形成的影响(略)表3  金耳菌丝发酵物各提取部位对小鼠全血凝血时间的影响(略)

　4  讨论

金耳菌丝发酵产物各提取部位药理研究结果表明,正丁醇部位高、低剂量组对凝血酶原时间及小鼠体内血栓形成皆有较显著影响,并呈现一定的剂量-效应关系,对小鼠凝血时间也有一定的影响；乙酸乙酯部位高剂量组对小鼠体内血栓形成有一定的影响,但对凝血酶原时间及小鼠凝血时间,影响不大；而水溶部位高剂量组能够一定程度延长凝血酶原时间,但对小鼠凝血时间及小鼠体内血栓形成无影响。这种现象可能是由于有效成分交叉存在于相邻组分中而导致的。综上可知,正丁醇部位是金耳菌丝发酵物抗凝血的有效部位,但其有效成分的化学本质及其发挥抗凝血作用的药理机制还需进一步探讨。

血栓形成与血栓栓塞是导致心血管疾病的因素之一,抗凝血和溶栓是有效的治疗方法。因此,寻找此类药物是重要的药学课题。金耳经过发酵可大量获得,而且作为开发此类药物的原料成本经济,前景可观。

谢 红,刘春卉,苏槟楠,等.金耳8254 的营养价值和药理研究[j].中国食用菌,2000,(6)：39－41.

[2] 刘春卉.金耳菌丝发酵产物抗血栓的生物活性研究[j].天然产物研究与开发,20xx,(4)：289－292.

[3] 吴祯久.洋虫对小鼠凝血时间和出血时间的影响[j].中药材,1996, 19(7)：361.

[4] 陈 奇.中药药理研究方法学[m].：卫生出版社,1993.481－484.

[5] 徐叔云,卞如濂,陈 修.药理实验方法学[m].：卫生出版社, 1994.1119－1123.

[6] 秦元满.狭叶寻麻抗凝血有效部位的探讨[j].中国中医药科技,20xx, 13(2)：72.

鸡骨草胶囊中栀子苷的含量测定_药学论文 第九篇

  目的 建立鸡骨草胶囊中栀子苷的hplc测定方法。方法 采用lichrospher c18色谱柱(5 μm,4.6 mm×250 mm)；以乙腈-0.1%磷酸溶液(10∶90)为流动相；流速：1.0 ml/min,检测波长：238 nm,柱温：35 ℃。结果 栀子苷在0.14～1.68 μg范围内呈良好的线性关系,回归方程为：y=1 552.15x-6.42,r=0.999 9；回收率为97.53% (rsd=1.24%,n=6)。结论 方法稳定、可靠,可用于该制剂的质量控制。

  高效液相色谱法；鸡骨草胶囊；栀子苷

determination of geniposide in jigucao capsule by hplc  wang yan-hong, chen xian

guangxi yulin pharmaceutical co.ltd.,yulin 537001, china

abstract：objective to estabilish a hplc method for the determination of geniposide in jigucao capsule. methods the column was lichrospher-c18 (5 μm, 4.6 mm×250 mm). the determination was carried out with acetonitrile-0.1% phosphoric acid (10∶90) as the mobile phase, a flow rate of 1.0 ml/min and detected at 238 nm, and temperature of the column was 35 ℃. results the calibration curve showed good linearity in the range of 0.14～1.68 μg, y=1 552.15x-6.42, r=0.999 9. the mean recovery was 97.53% (rsd=1.24%, n=6). conclusion the method is accurate, reliable, and can be used for quality control of the preparation.

key words：hplc；jigucao capsule；geniposide

鸡骨草胶囊具有疏肝利胆、清热解毒之功,用于急、慢性肝炎和胆囊炎属肝胆湿热证者,由鸡骨草、栀子、茵陈等药味组方。WwW.meiword.coM鸡骨草为方中君药,但由于该味药的植物化学研究工作较薄弱,尚未有符合含量测定要求的对照品,无法对其进行含量控制。茵陈为方中臣药,绿原酸为其消炎利胆的主要有效成分,但据资料显示,方中另一味臣药栀子也含有绿原酸[2],由于该成分不具有唯一性,故未作为含量测定指标。我们采用hplc法测定了栀子中栀子苷的含量,结果显示,方法准确可靠,可用于本品的质量控制。

　1  仪器、试剂与样品

上海必能信bug-40型超声清洗仪；agilent 1100系列高效液相色谱仪(g1379a degasser、g1311a quatpump、g1313a als、g1316a colcom、g1314a vwd)。

栀子苷对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号0749-9404,供含量测定用)。乙腈为色谱纯,水为高纯水,其它试剂均为纯。鸡骨草胶囊及缺栀子的阴性对照样品由玉林制药有限责任公司提供。

　2  方法学考察及含量测定

2.1  色谱条件

lichrospher c18色谱柱(5 μm,4.6 mm×250 mm)；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液(10∶90)；流速：1.0 ml/min；检测波长：238 nm；柱温：35 ℃；进样量为10 μl。

2.2  溶液的制备

2.2.1  对照品溶液的制备

精密称取栀子苷对照品适量,加70%甲醇溶解制成每1 ml含栀子苷50 μg的溶液,即得。

2.2.2  供试品溶液的制备

取装量差异项下的本品研细,取0.5 g,精密称定,加70%甲醇50 ml,称重,超声处理(功率500 w,频率50 khz)30 min,放冷,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤液,即得。

2.3  线性与范围

精密称取栀子苷对照品14.0 mg,置50 ml量瓶中,加甲醇使溶解并稀释至刻度,摇匀,备用。分别精密吸取以上对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml,分别置10 ml量瓶中,加70%甲醇稀释至刻度,摇匀,进样测定。以对照品进样量为横坐标、峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线,得回归方程为：y=1 552.15x-6.42,r=0.999 9。结果表明,栀子苷进样量在0.14～1.68 μg范围内,与峰面积呈良好的线性关系。

2.4  精密度试验

对同一栀子苷对照品溶液(浓度为56 μg/ml),按正文拟订的色谱条件,连续测定6次,结果峰面积平均值为864.1, rsd=0.69%。结果表明,本法的精密度较好。

2.5  重复性试验

对同一批样品(批号625020),按正文拟订的方法平行测定6份,结果栀子苷的平均值为2.590 mg/粒(rsd=1.07%, n=6)。结果表明,本法的重复性较好。

2.6  稳定性考察

对同一供试品溶液(批号625020),在23 h内,每隔一定时间测定1次,共测定6次,试验表明,被测物稳定。6次测定结果的平均值为2.597 mg/粒,rsd=0.69%。表明本柱稳定性较好。

2.7  加样回收率测定

精密称取已知含量(栀子苷的含量为2.590 mg/粒)的鸡骨草胶囊(批号625020,平均粒重0.501 0 g)约0.25 g,分别精密加入一定量的栀子苷对照品溶液,挥干溶剂后,按正文拟订的方法提取、测定,计算回收率。结果栀子苷平均回收率为97.53%, rsd=1.24%(n=6),符合定量的要求,见表1。表1  栀子苷加样回收率测定结果（略）

2.8  专属性试验

按本品处方、制法制成不含栀子的阴性样品。取缺栀子的阴性样品,按供试品溶液制备项下的方法提取,测定。结果在栀子苷峰相应的保留时间几乎无吸收峰,表明处方中其它成分对测定无干扰(见图1)。

2.9  样品测定

按拟订的含量测定方法,测定了本品5批样品中的栀子苷含量,结果见表2。表2  5批样品含量测定结果（略）

　3  讨论

3.1  流动相的选择

本试验参照相关文献,结合本品的实际情况,以乙腈-水(15∶85)、乙腈-0.1%磷酸溶液(10∶90)、甲醇-0.1%磷酸溶液(20∶80)为流动相试验,结果乙腈-0.1%磷酸溶液(10∶90)能使所测成分栀子苷峰形较好,且与杂质达到基线分离,分离度>1.5,达到要求,故选择乙腈-0.1%磷酸溶液(10∶90)为流动相。

3.2  测定波长的选择

参照20xx年版《中国药典》(一部)栀子项下项所使用波长238 nm选择作为测定波长[2]。

3.3  提取条件的选择

本试验参照有关文献[2-6],对提取溶剂、提取时间进行优化选择,结果采用70%或50%、30%的甲醇溶液超声处理30 min均可将栀子苷提取完全,50%、30%甲醇提取液较难滤过,故本试验选择70%甲醇超声处理30 min作为提取条件。

【参考文献】

[1] 尉 芹,马希汉.绿原酸及其提取分离方法评述[j].中成药,20xx,23 (2)：135－138.

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淡竹叶中总黄酮提取工艺研究_药学论文 第十篇

  目的 用正交试验法优选淡竹叶中总黄酮的提取工艺。方法 以20 g原药材的总黄酮提取量为评价指标,选择乙醇用量(倍)、提取时间(h)、提取次数(次)为考察因素,采用正交试验法l9(34)确定醇提取淡竹叶中总黄酮的最佳工艺。结果 最佳提取工艺条件为75%乙醇18倍量提取1.0 h,共提取1次,乙醇用量为显著影响因素。结论 首次进行了淡竹叶总黄酮正交提取工艺的研究,结果比较可靠。

  淡竹叶；总黄酮；正交试验

abstract：objective to study the optimum ethanol extraction process of total flavonoids in lophatherun gracile brongn. methods the extraction of total flavonoids was choosen as the assesent index. ethanol volumn extracting time and times were the studing factors. the optimum ethanol extraction process was selected with the orthogonal design. results the optimum ethanol extracting process conditions were as follows：adding 18 fold of 75% ethanol, extracting for 1.0 h and one in all. ethanol dosage was the predominant influencing factor. conclusion this optimum extradion process of total flavonoids in lophatherum gracle brongn is reliable.

key words：lophatherum gracile brongn；total flavonoids；orthogonal design

淡竹叶为禾本科多年生草本植物淡竹叶(lophatherum gracile brongn.)的干燥茎叶,主产于河南、安徽、江苏、浙江、福建、广东、广西等地。WwW.meiword.cOm该药味甘、淡、寒,归心、胃、小肠经,具有清热除烦、利尿的功效,多用于热病烦渴、口舌生疮、小便赤色淋痛等症。淡竹叶中含有的黄酮类化合物具有降脂、抗血栓、抗氧化、降糖等多种生理活性[2],因而有效地开发和利用淡竹叶中黄酮类化学成分具有重要意义。笔者选择总黄酮提取量[3]为评价指标,利用l9(34)正交试验,筛选醇提取淡竹叶中总黄酮的工艺条件,可为新药研究和充分利用淡竹叶药材资源提供参考依据。

　1  仪器、试剂与材料

hh-s型水浴锅(巩义市英峪华仪器厂)；re-52a旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；shz-d(ⅲ)循环水式真空泵(巩义市英峪华仪器厂)；754型紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司)；ay220电子天平(岛津)；dzf-6050真空干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)。

对照品芦丁购自中国药品生物制品检定所,批号为0080-9705；淡竹叶产地为浙江,加工单位为安徽丰原铜陵中药饮片有限公司,经南京中医药大学中药鉴定教研室吴启南教授鉴定,粉碎后备用。

医用酒精；甲醇ar级；蒸馏水；其余所用试剂均为纯。

　2  方法与结果

2.1  标准曲线的制备

精密称取在105 ℃干燥下的芦丁对照品0.020 0 g,置100 ml

容量瓶中,加适量甲醇溶解,定容至刻度,摇匀,即得对照品溶液(每1 ml中含无水芦丁0.2 mg)。

精密吸取上述对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml,分别置25 ml容量瓶中,各加水至6.0 ml,加5%亚硝酸钠溶液1 ml,混匀,放置6 min,加10%硝酸铝溶液1 ml,摇匀,放置6 min,加4%氢氧化钠试液10 ml,再加水至刻度,摇匀,放置15 min,进行全波长扫描,在510 nm处均有最大吸收。以510 nm 得的吸收度a对浓度c回归,以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标,绘制标准曲线,计算回归方程为a=3.865 7c-0.052 5 (r=0.999 4)。在8～48 μg/ml的范围内,浓度与吸收度有良好的线性关系。

2.2  总黄酮提取量的测定

按2.3.3项下方法制备样品。精密称定一定量的干燥品,用甲醇定容至25 ml容量瓶中,再精密吸取3 ml,置25 ml容量瓶中,照标准曲线制备项下的方法,自“加水至6.0 ml”起,依法测定吸光度。按照20xx版《中国药典》(一部)规定的方法测定。

2.3  醇提工艺条件的选择

2.3.1  醇提浓度的选择

将浙江产淡竹叶药材粉碎,称取20 g/份,共3份,加15倍量的50%乙醇,回流提取2 h(85 ℃),3份提取液分别进行抽滤,将滤液在旋转蒸发仪上浓缩(80 ℃,0.08 mpa),浓缩液在水浴锅上蒸至成稠膏状,再放置真空干燥箱中(80 ℃,0.08 mpa),24 h后取出,取少量醇浸膏测定总黄酮提取量。同法测定60%、75%、95%醇提液的总黄酮提取量(见表1)。结果表明,以20 g原药材中总黄酮提取量为考察指标,75%醇提液得到的总黄酮量最多,故采用75%乙醇提取的工艺。表1  醇提浓度的选择（略）

2.3.2  提取工艺的正交试验

按照上述单因素考察结果,按表2中的因素水平进行正交试验。表2  因素水平表（略）

2.3.3  正交试验方法与结果

将淡竹叶药材粉碎后,称取20 g,用l9(34)正交表安排试验(见表3)。将回流提取液分别过滤,滤液在旋转蒸发仪上浓缩(80 ℃,0.08 mpa),浓缩液放置在蒸发皿中于水浴锅上蒸至成稠膏状后,放置真空干燥箱中(80 ℃,0.08 mpa),24 h后取出,于干燥器中干燥1 h后称量,再按照2.2.1项下方法测定总黄酮的提取量,结果见表3。表3  正交试验设计表及结果（略）

2.3.4  方差

(见表4)表4  方差表（略）注：f0.05(2,2)=19。

由上述直观结果可知,以总黄酮提取量为考察指标,最佳提取工艺条件为a1b2c1,即18倍量75%乙醇回流提取1次,每次1.5 ｈ。方差结果显示：a因素(加醇量)对总黄酮提出有显著影响,b因素(提取时间),c因素(提取次数)对总黄酮提出无显著影响。结合生产实际,从降低生产成本出发,对提取条件作适当调整,确定醇提工艺条件为a1b3c1,即18倍量75%乙醇回流1 h,提取1次。

2.3.5  验证试验

称取20 g原药材,按照a1b3c1进行验证试验,结果见表5。表5  验证试验表（略）

　3  讨论

通过l9(34)正交表试验,最终确定淡竹叶中总黄酮醇提取工艺的条件为：75%乙醇18倍量提取1.0 h,共提取1次,其结果经验证试验确认该条件可行,可以作为大生产的参考工艺条件。

[1] 江苏新医学院.中药大辞典(下册)[m].上海：上海科学技术出版社, 1977.2253－2254.

[2] 韩公羽,沈企华.植物药有效成分的研究与开发[m].杭州：杭州大学出版社,1991.94－102.

[3] 孙佩霞,叶丽卡,张晓丽,等.比色法测定淫羊藿胶囊中总黄酮的含量[j].沈阳药科大学学报,1999,16(1)：68－70.

[4] 国家药典委员会.中国药典(一部)[s].：化学工业出版社,20xx.附录28.

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